王梦亮，岳竹

（山西大学应用化学研究所，山西太原 030006）

 

摘 要：从本实验室筛选得到的类球红杆菌（Rhodobacter sphaeroides）中，通过超声破碎、硫胺沉淀、DEAE-Sephadex A-25阴离子交换层析分离得到一种较纯的依赖NADPH的羰基还原酶。对其进行SDS-PAGE电泳分析，显示一条带，测得其相对分子量约为37kD。建立了羰基还原酶催化苯乙酮反应体系并对其进行优化，得出该酶催化苯乙酮的最适反应pH值为8，最适温度为37 ℃，在pH值为7～9之间比较稳定，其热稳定性较低。该酶对苯乙酮的米氏常数Km和最大反应速率Vmax分别为0.26 mmol · L-1和　　 2.4 μmol · min-1 · mg-1，最佳反应时间为24 h。催化苯乙酮的主要产物为(S)-苯乙醇，其产率为58.5%，ee值可达到99%以上，是很有前景的生物催化剂之一。对酶催化与辅酶再生体系相结合进行了初步的研究，提出了氢化酶再生辅酶与菌绿素再生辅酶体系，为今后的酶催化工业生产奠定了基础。

关 键 词：类球红杆菌；羰基还原酶；苯乙酮 

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《分子催化》，2010, 24（1）: 87-92