杨江科，曹雄文，舒钟瑶

（分子生物物理教育部重点实验室，华中科技大学生命科学与技术学院，武汉 430074）

摘要：基于sol-gel工艺的生物印迹对提高脂肪酶在非水相体系中的活性，扩大其应用范围具有重要作用。本研究以乙烯基三甲氧基硅烷（VTMOS）和四甲氧基硅烷（TMOS）为前趋体系统考察了脂肪酸印迹分子对sol-gel脂肪酶固定化率和活性的影响，获得了最优的工艺条件。当VTMOS/TMOS为7:1时，印迹后脂肪酶的比酶活和总酶活分别达到3311.0 µmol/h/mg和2506.9 µmol/h/g Gel，比未印迹同摩尔比的固定化脂肪酶分别提高了2.06和1.79倍。本研究系统考察了脂肪酸生物印迹效应和胶体结构对固定化酶表观活性的影响。氮气吸附—解吸附分析和扫描电镜观察表明，随着脂肪酸分子的参入，固定化脂肪酶颗粒平均孔径增大，对底物的传质阻力逐渐降低，但比表面积和孔体积的变化并不显著；印迹酶平均颗粒直径明显减小，各有机硅烷单体之间的成键能力减弱。表明脂肪酶活性的增加主要来源于疏水性脂肪酸侧链引起的脂肪酶的界面激活效应（生物印迹效应），同时固定化颗粒孔径的改变了增加了底物和酶分子的结合，提高了固定化酶的表观活性。

关键词：脂肪酶；脂肪酸；分子印迹；界面激活；孔径

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《分子催化》，2010, 24（1）: 77-81